以往實(shí)驗(yàn)室的核酸提取常用苯酚氯仿抽提法，但由于使用了苯酚、氯仿等試劑，毒性較大，長(zhǎng)時(shí)間操作對(duì)人員健康有較大影響，而且核酸的回收率較低，損失量較大，由于操作體系大，不同實(shí)驗(yàn)人員操作重復(fù)性差，不利于保護(hù)核酸，很難進(jìn)行微量化的操作?，F(xiàn)在為大家介紹離心柱法核酸提取試劑盒產(chǎn)品。

離心柱法核酸提取試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn):

安全低毒：試劑盒基于硅膠柱純化技術(shù)，提取過(guò)程中無(wú)需使用有毒的酚、氯仿抽提。

操作簡(jiǎn)便：30~40 min 內(nèi)完成數(shù)個(gè)樣品的DNA/ RNA 提??； 

DNA提取試劑盒: 

DNA純度高：提取的基因組 DNA 片段完整、純度高，可直接用 于下游 PCR 擴(kuò)增、qPCR、分子標(biāo)記以及文庫(kù)構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。

RNA提取試劑盒:

高效去除基因組 DNA：采用膜過(guò)濾及 DNase I 消化，高效去除基因組 DNA； 

RNA 純度高：提取的 RNA 無(wú)雜質(zhì)殘留，適用于對(duì)純度、完整性要求很高的下游實(shí)驗(yàn)。

沒(méi)有蛋白和其他雜質(zhì)的污染，可直接 用于 RT-PCR、Northern Blot、Poly A 純化、核酸保護(hù)和體外翻譯等實(shí)驗(yàn)。

1) 樣品用量過(guò)多。建議按照說(shuō)明書推薦量進(jìn)行提取； 

2) 樣品富含多糖多酚類物質(zhì)。處理富含多糖多酚的組織，推薦用專用試劑盒； 

3) 離心溫度過(guò)低。本產(chǎn)品使用操作均在室溫下進(jìn)行。 

1) 樣品用量過(guò)少。建議按照說(shuō)明書推薦量進(jìn)行提??；

2) 樣品材料質(zhì)量不好。盡量選用新鮮組織樣品，樣品采集后應(yīng)液氮速凍，然后置于-80℃保存，建議 盡快提取，避免反復(fù)凍融； 

3) 樣品裂解不充分。若樣品過(guò)量則適當(dāng)減少樣品量，加入 Buffer GP1 后需渦旋振蕩 1min 使其充 分混勻，可適當(dāng)延長(zhǎng)裂解時(shí)間。 

1) 未加入 RNase A 消化。請(qǐng)按照說(shuō)明書要求加入 RNase A 消化； 

2) 樣品中 RNA 含量過(guò)多。可適當(dāng)增加 RNase A 用量或延長(zhǎng)消化時(shí)間。

處理方法同DNA提取常見問(wèn)題Q1。

1) 樣品用量過(guò)多。影響裂解液的裂解能力，造成 RNase 未被充分抑制，導(dǎo)致 RNA 降解，建議參考 說(shuō)明書推薦取樣量，若要增加樣品起始量，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)中各溶液量均要按等比例增加。對(duì)于內(nèi)源 RNase 含量較多的組織應(yīng)減少樣品量，適當(dāng)增加裂解液用量； 

2) 樣品保存不當(dāng)。反復(fù)解凍會(huì)引起 RNA 降解，盡量使用新鮮樣品或者解凍次數(shù)不超過(guò) 2 次的樣品； 

3) 操作過(guò)程中引入 RNase 污染。請(qǐng)使用 RNase-Free 的工具、試劑和耗材； 

4) 電泳過(guò)程中發(fā)生降解。使用 RNase-Free 的 Loading Buffer、瓊脂糖和電泳緩沖液等。 

1) 樣品用量過(guò)多。樣品過(guò)量會(huì)影響裂解效果，建議按照說(shuō)明書要求適量取樣； 

2) 樣品裂解不充分。請(qǐng)按照說(shuō)明書的要求進(jìn)行充分研磨、裂解； 

3) 洗脫不充分。RNase Free H2O 需直接加到膜中央，并靜置 2 min 后再離心，必要時(shí)可進(jìn)行二次 洗脫以提高產(chǎn)量； 

4) 吸附柱有乙醇?xì)埩?。使?Buffer PRW1 漂洗后需要開蓋晾干吸附柱中的乙醇。

1) 樣品用量過(guò)多。超出試劑盒規(guī)定的樣本量影響裂解液的裂解能力可能會(huì)導(dǎo)致基因組的污染； 

2) 次生代謝物較多。次生代謝物含量高的樣本在提取 RNA 時(shí)易出現(xiàn)基因組的污染； 

3) 操作過(guò)程中需要進(jìn)行去除基因組 DNA 的操作，若 DNA 含量較多，可延長(zhǎng) DNase I 消化時(shí)間或重復(fù)消化。

核酸提取產(chǎn)品信息